Estudo da interação entre os inibidores de serinoproteases rBmTI-A e rBmTI-6 com TMPRSS2, uma serinoprotease transmembranar envolvida na entrada de SARS-CoV-2 em células humanas

Este projeto objetiva investigar o potencial inibitório de dos inibidores de serinoproteases, rBmTI-A e rBmTI-6 sobre a protease TMPRSS2, são dois inibidores protéicos, da família Kunitz-BPTI. Os inibidores já foram estudados pelo nosso grupo de pesquisa e testados inclusive sobre modelo de enfisema pulmonar, com resultados promissores. Os inibidores serão produzidos na forma recombinante, expressos em sistema de expressão em levedura Pichia pastoris e purificados. Posteriormente serão realizados ensaios sobre a protease TMPRSS2 para identificação de atividade inibitória e determinação da constante de dissociação (Ki) que nos fornecerá informação sobre o potencial inibitório de rBmTI-A e rBmTI-6 sobre TMPRSS2. Além disso, realizaremos estudos de interação molecular de rBmTI-A e rBmTI-6 e TMPRSS2 por meio de modelagem das estruturas dos inibidores e da serinoprotease e por ensaios de docking das estruturas, com aplicação também de ensaios de dinâmica molecular, com o objetivo de avaliar as interações importantes para a inibição da TMPRSS2 pelos inibidores recombinantes.